海洋细菌Vibrio fluvialis的分离鉴定、产琼胶酶条件优化及酶的分离纯化

• 作者: 戚勃 李春生 李驰 杨贤庆 王悦齐 赵永强
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 琼胶酶 Vibriofluvialis 分离 鉴定 纯化
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-42
• 页数: 8页
• 字数: 5653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023053

摘要

利用琼胶酶生产琼胶寡糖具有良好的应用前景,然而目前产琼胶酶菌株的性状不稳定、酶活力低等因素限制了琼胶酶的工业化应用.从龙须菜表面筛选出1株具有高琼胶酶活力的菌株A8,利用VITEK 2 GN微生物鉴定系统和16S rRNA基因序列分析,分别进行生理生化和分子生物学鉴定,确定该菌为Vibrio fluvialis A8.通过单因素试验和正交试验确定该菌的最适产酶培养基为:在人工海水中添加2g/L琼脂、3g/L半乳糖、3g/L酵母浸粉、5 g/L NaCl;最适培养条件为:接种量2％、温度20℃、pH 7.0.优化后发酵液琼胶酶的活力为21.80 U/mL,是优化前的4.05倍.Pearson相关性分析表明,菌株生长对其产酶有正相关影响(P<0.01).采用(NH4)2SO4分级沉淀和DEAE阴离子交换层析对琼胶酶进行分离纯化,琼胶酶的纯化倍数为3.26,比活力为141.52 U/mg,回收率为15.21％.SDS-PAGE凝胶电泳分析显示,琼胶酶的分子质量约为37 kDa.