约氏黄杆菌HSL13中新型α-淀粉酶的表达及酶学性质初探

• 作者: 丁梦瑶 谢会芳 杨江科
• 来源期刊: 生物技术
• 关键词: 约氏黄杆菌 淀粉酶 克隆表达 酶学性质 底物特异性 酶促动力学
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著|Research Paper
• 页码范围: 525-530,524
• 页数: 7页
• 分类号: Q814.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.06.0082

摘要

[目的]筛选并获得产α-淀粉酶的菌株,并初步研究其酶学性质.[方法]从红树林土壤样品中筛选到一株产、α-淀粉酶的菌株约氏黄杆菌HSL13,克隆了其α～淀粉酶基因Fjamy2,构建了pPICZαA-Fjamy2重组表达载体,并在毕赤酵母中表达,然后对该淀粉酶的底物特异性、酶学性质和酶学动力学参数进行了测定.[结果]淀粉酶基因Fjamy2的最适温度为40℃,在10℃～30℃内比较稳定;最适pH为5.0,在pH5.0～11.0内较稳定;其对多种淀粉底物以及糖原、糊精等均有良好的水解作用;对其动力学进行测定得知Vmax为0.084 1 pmol/min,Km为3.35 mg/mL,Kcat为45.35s-1.[结论]新型淀粉酶Fjamy2在中低温酸性条件下具有优良的活性,最适条件下比酶活为81 U/mg,成功地实现了在毕赤酵母中的异源表达.