DZNep靶向EZH2抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖

• 作者: 刘琦 王丽花 王教 赵云萍 金珊珊 闫东升
• 来源期刊: 中华眼视光学与视觉科学杂志
• 关键词: 葡萄膜黑色素瘤 EZH2 3-deazaneplanocin A 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 492-499
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115909-20190202-00033

摘要

目的:探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A (DZNep)对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响.方法:实验研究.先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞(UM95、UM96)和葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中的表达,然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理,作为实验组;以溶剂DMSO处理作为阴性对照组.采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期.Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平,细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响.组间数据均采用独立样本t检验进行比较.结果:EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高(t=25.050,P=0.002;t=14.220,P=0.005).MTS结果显示,DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性,呈浓度和作用时间依赖性.与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量显著降低(t=3.364,P=0.015;t=6.997,P＜0.001),并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少(t=5.117,P=0.002;t=3.399,P=0.015).流式细胞术检测结果显示,与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞处于G1期的细胞比例均显著升高(t=6.199,P=0.003;t=3.729,P=0.020).Westernblot检测结果显示,与阴性对照组相比,实验组M23和SP6.5细胞中的EZH2(t=5.214,P=0.035;t=13.530,P=0.005)、p-Rb(t=4.551,P=0.045;t=4.655,P=0.043)、E2F1(t=8.090,P=0.015;t=9.313,P=0.011)以及p-ERK(t=4.819,P=0.040;t=8.951,P=0.012)表达均有降低,H3K27me3修饰水平显著下降(t=5.257,P=0.034;t=5.697,P=0.030).结论:DZNep能够抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,具有治疗葡萄膜黑色素瘤的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘琦	温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室	13	49	5.0	6.0
2	王丽花	温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室	5	0	0.0	0.0
3	赵云萍	温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室	3	0	0.0	0.0
4	金珊珊	温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室	3	2	1.0	1.0
5	王教	温州医科大学附属眼视光医院省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室	7	5	1.0	2.0