中华蜜蜂AcerOr1基因昆虫表达载体pIB/V5-His的构建及功能分析

• 作者: 任有蛇 姜玉锁 徐兵 赵慧婷 郭丽娜
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华蜜蜂 气味受体AcerOr1 pIB/V5-His 表达 亚细胞定位 功能分析
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 359-365
• 页数: 7页
• 分类号: S891
• 字数: 4560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.04.001

摘要

[目的]构建能在Sf9昆虫细胞中稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr1的重组表达载体,并对其功能进行分析.[方法]将目的基因AcerOr1和昆虫表达载体pIB/V5-His载体用Bam HI和EcoRI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含目的基因AcerOr1的表达载体pIB/V5-AcerOr1.将重组表达载体用脂质体转染的方法转染至Sf9细胞中,利用免疫荧光和Western blot检测AcerOr1蛋白的亚细胞定位和表达情况;利用全波长多功能酶标仪检测该受体对4种花香物质刺激后细胞内Ca2+浓度的变化.[结果]成功构建重组表达载体pIB/V5-AcerOr1并建立稳定转染细胞系;Western blot结果证明重组表达载体能在昆虫细胞Sf9中表达;免疫荧光显示重组表达载体在Sf9细胞膜上表达,与预测结果一致.转染pIB/V5-AcerOr1的细胞受花香物质月桂酸(Lauric acid)、亚麻酸(Linolenic acid)、α-松油醇(α-Terpineol)、十一酸(Undecanoic acid)刺激时,均能引起细胞内Ca2+浓度升高.[结论]构建的重组表达载体pIB/V5-AcerOr1能在Sf9细胞中稳定表达,并具有对气味分子的识别功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任有蛇	山西农业大学动物科技学院	150	714	13.0	18.0
2	郭丽娜	山西农业大学动物科技学院	29	200	9.0	13.0
3	姜玉锁	山西农业大学动物科技学院	62	265	8.0	15.0
4	徐兵	山西农业大学工学院	10	3	1.0	1.0
5	赵慧婷	山西农业大学生命科学学院	35	169	7.0	12.0