焦亡介导高糖引起的小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1炎症与损伤

• 作者: 傅晓莹 吴文 张伟杰 智喜梅 梁伟杰 王瑞雪 罗立慧 邓海鸥 郑扬希
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞焦亡 胱天蛋白酶1 糖尿病 骨质疏松症 成骨细胞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 598-605
• 页数: 8页
• 分类号: R587.2|R363.2
• 字数: 5678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.04.003

摘要

目的:探讨细胞焦亡(pyroptosis)能否介导高糖(HG;45 mmol/L葡萄糖)引起的小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1炎症和损伤.方法:应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测成骨细胞活力;Western blot测定成骨细胞的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和胱天蛋白酶1(CASP1)的表达水平;ELISA法测定细胞培养上清液中白细胞介素18(IL-18)和IL-1β的水平;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯染色荧光显微镜照相法检测胞内活性氧(ROS)水平;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位(MMP)水平;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定成骨细胞早期标志物ALP的活性;茜素红染色观察成骨细胞晚期标志物矿化结节的形成.结果:HG处理MC3T3-E1细胞24 h可明显促进NLRP3和CASP1的表达,引起IL-18和IL-1β的分泌增多,同时可使细胞活力降低,ROS生成和MMP丢失增加,成骨细胞分化与矿化功能下降(表现为ALP活性降低和矿化结节数量减少).利用siRNA沉默CASP1表达可显著减轻HG引起的上述成骨细胞炎症和损伤.结论:焦亡可介导HG引起的MC3T3-E1细胞炎症和损伤.