共表达细胞因子IL-7和趋化因子CCL19/CCL21的第4代anti-CD19CAR-T细胞的开发与应用

• 作者: 于琪英 何红鹏 张同存 王楠 罗学刚 胡浩 赵文静 顾潮江 马文建
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嵌合抗原受体 第4代anti-CD19 CAR-T细胞:细胞因子IL-7 趋化因子CCL19/CCL21 急性B淋巴细胞白血病
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 348-357
• 页数: 10页
• 分类号: R733.71|R730.51
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20200057

摘要

目的 初步探讨共表达细胞因子IL-7和趋化因子CCL19或CCL21的anti-CD19 CAR-T细胞的功能特性及其在体外对人CD19+急性淋巴细胞白血病(B-ALL)的杀伤效果,旨在优化CAR-T细胞各项功能,增强其对血液瘤、实体瘤的治疗效果.方法 通过亚克隆技术获得重组慢病毒质粒,慢病毒包装,转导原代T细胞获得2种第4代anti-CD19CAR-T细胞,分别命名为7×19 CAR-T细胞、7×21 CAR-T细胞.借助流式细胞仪和相关试剂盒检测了细胞CAR分子的转导效率、CAR-T细胞的趋化能力、增殖及凋亡情况等;钙黄绿素释放法检测CAR-T细胞的杀伤作用;共培养法检测CAR-T细胞因子的释放情况;2种第4代anti-CD19 CAR-T细胞组皆于原代T细胞、常规anti-CD19 CAR-T细胞作比较.结果 7×19 CAR-T、7×21 CAR-T细胞的功能特性皆有显著提高,主要表现在细胞增殖速度加快、细胞凋亡速率明显变慢、炎症因子IFN-γ、肿瘤坏死因子TNF-α的分泌量皆有所增加;且体外杀伤实验表明阳性率约40％的7×19 CAR-T、7×21 CAR-T细胞对CD19+肿瘤细胞Raji的杀伤效率高于阳性率约50％ anti-CD19 CAR-T细胞(P＜0.01);结论实验数据显示共表达细胞因子IL-7和趋化因子CCL19或CCL21的第4代anti-CD19 CAR-T细胞即7×19 CAR-T和7×21 CAR-T细胞相比第3代anti-CD19 CAR-T细胞和T细胞在趋化能力、细胞增殖、细胞凋亡、体外杀瘤效果以及细胞炎症因子的释放能力等方面皆有显著改善,初步证明了7×19 CAR-T细胞和7×21 CAR-T细胞的各项功能有所优化,对CD19+人急性淋巴细胞白血病治疗效果得到改善,为开发靶向CD19的新型CAR-T细胞提供了新思路,这种模式也为其它类型CAR-T细胞的开发开创了典范.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗学刚		16	125	4.0	11.0
2	王楠		25	76	5.0	8.0
3	张同存		31	69	5.0	6.0
4	何红鹏		5	1	1.0	1.0
5	马文建		7	2	1.0	1.0
6	赵文静		1	0	0.0	0.0
7	于琪英		1	0	0.0	0.0
8	胡浩		1	0	0.0	0.0
9	顾潮江		1	0	0.0	0.0