土木香内酯抑制食管癌EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭并促进其凋亡

• 作者: 王紫洁 胡庆 陈欢 李婷 李强 邓明明
• 来源期刊: 肿瘤
• 关键词: 食管肿瘤 土木香内酯 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic Research
• 页码范围: 665-675
• 页数: 11页
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2020.11.106

摘要

目的:研究土木香内酯(alantolactone)对食管癌EC9706细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探讨可能的作用机制.方法:用不同浓度的土木香内酯处理食管癌EC9706细胞,以DMSO处理的EC9706细胞作为对照组.分别用结晶紫染色法、MTT法和克隆形成实验检测土木香内酯对EC9706增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell小室法检测对EC9706细胞迁移和侵袭能力的影响;Hoechst 33258染色法检测对EC9706细胞凋亡的影响.蛋白印迹法检测侵袭转移相关蛋白基质金属蛋白酶7 (matrix metalloproteinase-7,MMP-7)、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)和Snail,以及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、剪切型-caspase 3(cleaved-caspase 3)、caspase 3蛋白的表达水平.分别采用荧光素酶报告法和蛋白印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路的活性及相关蛋白β-连环蛋白([β-catenin)、细胞周期相关蛋白D1 (cyclin D1)和c-Myc的表达水平.结果:与对照组相比,土木香内酯可以明显抑制EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡(P值均＜ 0.01),呈剂量和时间效应关系.不同浓度的土木香内酯均能上调凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase 3和caspase 3的表达水平(P值均＜0.01),下调抗凋亡蛋白Bcl-2、侵袭转移相关蛋白MMP-7、MMP-9、Vimentin和Snail的表达水平(P值均＜0.01).荧光素酶报告系统显示,土木香内酯能使T细胞因子/淋巴增强因子(T-cell factor/lymphoid enhancer factor,TCF/LEF)的转录活性明显下降(P＜0.01);蛋白质印迹法检测结果显示土,木香内酯能明显抑制β-catenin、cyclin D1和c-Myc蛋白的表达水平(P值均＜0.01).结论:土木香内酯可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性,抑制EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡.