流产布鲁氏菌转录调控因子GntR在小鼠模型上诱导的辅助性T细胞免疫应答

• 作者: 原宝东 李志强 杨岚 王书利 田婷婷 罗怡馨 赵书杰 郭文静
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 布鲁氏菌 转录调控因子GntR 免疫反应
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 805-814
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20190333

摘要

[目的]通过对布鲁氏菌gntR基因进行原核表达,分析其诱导机体产生的Th1和Th2型免疫反应.[方法]以布鲁氏菌S2308基因组为模板,根据GenBank上公布的S2308gntR基因序列设计引物,利用分子克隆技术,将gntR基因片段克隆至原核表达载体pET-30a,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,诱导GntR蛋白表达;利用SDS-PAGE对GntR重组蛋白(rGntR)进行分析;利用AKTAxpress智能多维纯化系统对rGntR进行纯化;利用Western blotting分析其免疫反应性;用rGntR刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7和小鼠脾细胞,利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-5,以及IgG抗体的水平.将rGntR免疫小鼠,检测小鼠血清中IFN-γ和IL-4的水平.[结果]gntR基因大小为735bp,编码245个氨基酸,大约在35 kDa处出现蛋白条带,纯化后为单一条带.WB显示,rGntR具有较好的免疫反应性.rGntR可诱导宿主细胞和小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4和IgG.[结论]rGntR可在体内或体外诱导辅助性T细胞(Th1和Th2型)免疫反应.本研究可为布鲁氏菌病疫苗的研发提供科学依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李志强	商丘师范学院生物与食品学院	13	8	2.0	2.0
2	王书利	商丘师范学院生物与食品学院	5	0	0.0	0.0
3	赵书杰	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
4	罗怡馨	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
5	杨岚	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
6	郭文静	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
7	田婷婷	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0