脂多糖诱导SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞炎症模型建立及特征分析

• 作者: 彭艳 李宇 江旭 熊仁平 熊翱 许建中
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 成纤维样滑膜细胞 原代培养 波形蛋白 炎性关节病 模型
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 436-446
• 页数: 11页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 9957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2020.04.002

摘要

目的 建立Sprague Dawley(SD)大鼠的正常膝关节滑膜细胞原代培养方法及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)炎症模型.方法 选取80～120 g SPF级幼年SD大鼠,分离其滑膜组织,原代培养至第3代,用组织化学染色法和EdU法检测FLS蛋白标志物vimentin和增殖功能.同时,用滑膜组织作对照,检测第3代至第8代原代培养FLS的特征蛋白表达,筛选具有生理功能的高纯度且可用于后续实验的FLS细胞.LPS诱导FLS炎症后,检测LPS制激FLS不同时间点的IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达,根据实验结果确定LPS成功诱导FLS炎症模型的时间点.最后,检测FLS被LPS诱导前后的细胞因子、增殖功能和特征蛋白的表达,为分析FLS炎症模型提供实验数据.结果 采用0.2％I型胶原酶消化法,成功培养了FLS原代细胞.经检测蛋白标志物vimentin,第3代FLS纯度达98％以上.通过FLS特征蛋白检测,筛选出具有生理功能且可用作后续实验的FLS为第3代至第7代原代细胞.通过对LPS诱导后的FLS的细胞因子和特征蛋白分析,确定1μg/mL LPS诱导FLS细胞3 h,能复制出FLS炎症模型.结论 LPS诱导的FLS炎症模型可作为体外研究炎性关节病的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许建中	郑州大学第一附属医院骨科	113	517	11.0	17.0
2	李宇	郑州大学第一附属医院骨科	10	31	4.0	5.0
3	彭艳	中国人民解放军陆军特色医学中心野战外科研究部	2	1	1.0	1.0
4	熊翱	郑州大学第一附属医院骨科	5	8	2.0	2.0
6	熊仁平	中国人民解放军陆军特色医学中心野战外科研究部	2	3	1.0	1.0
9	江旭	郑州大学第一附属医院骨科	1	0	0.0	0.0