禽波氏杆菌16SrRNA和ompA基因双重PCR检测方法的建立

• 作者: 伊惠 崔晨晨 张潇月 朱瑞良 李宇 杨萍萍 袁朋 马春雨 黄莎茫
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽波氏杆菌 双重PCR 检测
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3381字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中登录的禽波氏杆菌(B.avium)16S rRNA和ompA基因序列设计引物,经PCR反应条件优化,建立了检测禽波氏杆菌的双重PCR方法.该方法能够同时扩增B.avium基因组中的16S rRNA和ompA基因的特异序列,而对禽源大肠埃希菌(Escherichia coli)、沙门菌(Salmonella)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)等菌株的扩增结果均为阴性.该方法对B.avium基因组DNA检测的敏感性可达1.25×104 copies/μL,对其菌液检测的敏感性可达1.2×103 cfu/mL,对临床样品的检测结果表明,建立的双重PCR方法与16S rRNA单一PCR检测方法符合率为100％.建立的双重PCR检测方法为B.avium的检测提供了快速、准确、灵敏、特异的检测方法.