家蚕几丁质脱乙酰基酶BmCDA7的纯化与生化性质

• 作者: 刘霖 杨君 杨青 郭兴明
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鳞翅目昆虫 围食膜 几丁质脱乙酰基酶 害虫防治
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 72-78
• 页数: 7页
• 分类号: S432
• 字数: 5426字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2019.06.012

摘要

几丁质脱乙酰基酶是几丁质修饰关键酶,在昆虫几丁质组装过程中发挥重要作用,是潜在的绿色农药靶标.课题组近期研究发现家蚕中肠3个几丁质脱乙酰基酶中,BmCDA7对围食膜几丁质具有最高活性,在进食期高表达,可能参与该时期围食膜形成.本研究通过进一步优化分离纯化条件,建立了金属螯合层析和阴离子交换层析两步分离纯化方法,获得了高纯度的BmCDA7重组蛋白.采用SDS-PAGE结合Calcofluor White M2R显色定性确定了BmCDA7对底物乙二醇几丁质的催化活性.通过测定催化反应过程中释放的乙酸量,确定了BmCDA7的最适反应条件、稳定性及底物选择性.BmCDA7催化反应最适温度为60℃,最适pH为8.0,在温度低于60℃以及中性、偏碱性条件下较为稳定.此外,BmCDA7对乙二醇几丁质、胶体几丁质的酶活力分别为2.9926和0.4270 μmol/(min·μmol),而对高结晶度的α-几丁质和β-几丁质无活力.这些结果丰富了昆虫几丁质脱乙酰基酶的生物化学基础研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨青	大连理工大学生物工程学院	29	142	7.0	11.0
2	杨君	大连理工大学生物工程学院	39	311	10.0	16.0
3	郭兴明	大连理工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
4	刘霖	大连理工大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0