LNK基因表达改变对THP-1细胞增殖及凋亡的影响

• 作者: 沙梦琪 田润梅 陈婷婷 陈艳 龙圆圆
• 来源期刊: 遵义医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: LNK基因 人急性单核细胞白血病细胞 沉默 过表达 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 581-588
• 页数: 8页
• 分类号: R733.71
• 语种: 中文

摘要

目的 初步探讨沉默及过表达LNK基因后对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖及凋亡的影响,为研究白血病靶向治疗提供新方向.方法 实验分为4组:沉默LNK组(Si-LNK)、过表达LNK组(VP-LNK)、空转组(Empty virus group)及对照组(Control group).慢病毒转染THP-1细胞,建立稳定沉默及过表达LNK基因细胞株;转染72 h后,观察沉默LNK组、过表达LNK组及空转组绿色荧光蛋白(GFP)的表达量,流式细胞仪检测慢病毒感染效率;RT-PCR及Western blot检测LNK基因mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测THP-1细胞在24、48、72 h的增殖情况,流式细胞术检测THP-1细胞凋亡率.结果 经慢病毒感染72 h,沉默LNK组、过表达LNK组及空转组THP-1细胞的感染效率在99％以上.与对照组相比,沉默组LNK基因的mRNA水平及蛋白表达水平均显著降低,而过表达组均显著升高,说明LNK基因沉默或过表达成功.CCK-8法及流式检测结果显示沉默LNK组较对照组细胞增殖活性降低,且细胞凋亡率明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组及空转组相比,过表达LNK组THP-1细胞的增殖活性及细胞凋亡率无明显升高或降低,差异无统计学意义(P>0.05).结论 沉默LNK基因可显著抑制THP-1细胞增殖,促进其凋亡,但过表达LNK对细胞增殖及凋亡无明显影响.