家蚕碱性核酸酶BmdsRNase的原核表达和对dsRNA的降解效果

• 作者: 冯韵锖 陈佩婵 李佳璇 刘吉升
• 来源期刊: 蚕业科学
• 关键词: 昆虫 RNA干扰 BmdsRNase dsRNA降解
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Research Papers
• 页码范围: 566-572
• 页数: 7页
• 分类号: S881.2|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2020.05.006

摘要

dsRNase是一种DNA/RNA非特异性碱性核酸酶,这类酶具有广泛的底物特异性,可影响鳞翅目昆虫的RNA干扰效率.为验证从家蚕消化液分离的BmdsRNase能否在家蚕体外表达并降解dsRNA,根据其功能域构建了3个不同基因片段的表达载体,转化大肠埃希菌进行原核表达,体外诱导培养后进行dsRNA的降解试验.SDS-PAGE显示BmdsRNase的3个基因片段均能在原核系统中表达,最适宜的蛋白质诱导时间为2 h,表达产物主要以包涵体形式存在.实时定量PCR结果表明,3种重组表达菌的表达产物均可降解dsRNA.上述结果为后续研究BmdsRNase的功能,以及鳞翅目昆虫的RNA干扰机制提供了实验数据.