利用CRISPR/Cas9技术敲除XPO1基因对胰腺癌细胞株生物学功能的影响

• 作者: 庄燕妍 张世能 李苑华 黄凤婷 黄娴娴
• 来源期刊: 岭南现代临床外科
• 学科: 医学
• 关键词: CRISPR/Cas9 XPO1 基因敲除 胰腺癌
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著与临床研究
• 页码范围: 280-284,290
• 页数: 6页
• 分类号: R735.9
• 字数: 3579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2020.03.003

摘要

目的 利用CRISPR/Cas9技术构建XPO1基因敲除的胰腺癌细胞株MIA-Paca2,初步探讨XPO1敲除对细胞生物学功能的影响.方法 构建sgRNA-XPO1质粒,包装成慢病毒感染MIA-Paca2细胞,用合适浓度的嘌呤霉素筛选获得XPO1敲除的稳转株,DNA测序及蛋白质印迹法检测XPO1敲除效率;流式细胞分析及CCK8实验分别检测细胞凋亡、细胞周期及其对吉西他滨的半数抑制浓度(IC50).结果 DNA测序显示编码XPO1蛋白的基因序列发生移码突变,蛋白质印迹法、流式细胞技术及CCK8结果显示XPO1基因敲除后的MIA-Paca2细胞株XPO1蛋白表达量明显降低,细胞凋亡增多,G2/M期细胞比例增加,对吉西他滨IC50降低.结论 利用CRISPR/Cas9成功构建XPO1基因敲除的MIA-Paca2细胞株,XPO1基因敲除可促进细胞凋亡,引起细胞周期G2/M期阻滞,增强吉西他滨化疗敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张世能	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	43	184	8.0	10.0
2	黄娴娴	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	7	18	3.0	4.0
3	黄凤婷	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	15	39	4.0	5.0
4	李苑华	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	2	1	1.0	1.0
5	庄燕妍	中山大学孙逸仙纪念医院消化内科	10	26	3.0	4.0