醉马草DNA提取方法的对比与优化

• 作者: 李春杰 苏楷淇 陈雅琦
• 来源期刊: 草学
• 学科: 农学
• 关键词: 醉马草 DNA提取质量 SDS法 CTAB法 高盐法 纯化
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 草业科学
• 页码范围: 32-38
• 页数: 7页
• 分类号: S543.03
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2096-3971.2020.05.006

摘要

醉马草是一种多年生牧草,为禾本科芨芨草属,常用于机场草坪建植和草原生态恢复,因其重要的经济与生态价值近年来被广泛研究关注.醉马草幼苗含有的酚类、蛋白质等杂质严重影响DNA的提取质量,常规技术不能很好地满足高质量的实验要求.本实验以醉马草幼苗为材料,分别采用SDS、CTAB、高盐法提取醉马草幼苗全基因组DNA.研究发现使用SDS法提取的DNA浓度为176ng·μL-1,提取率为30％,A值为1.7.使用CTAB法提取的DNA浓度为140ng·μL-1,提取率为23％,A值为1.68.使用高盐法提取的DNA浓度为37.7ng·μL-1,提取率为6％,A值为1.1.利用CTAB对提取出的DNA进一步纯化,用琼脂糖凝胶电泳和超微量分光光度计检测DNA的浓度和纯度,通过PCR分析验证优化后CTAB法提取DNA的效果.结果 表明各方法纯化后的DNA浓度为:SDS法(223ng·μL-1)＞CTAB法(219ng·μL-1)＞高盐法(77ng· μL-1);A值为:SDS法(1.8) ＞CTAB法(1.77)＞高盐法(1.4),其中DNA浓度较纯化前分别提高27.1％(SDS法)、57.1％(高盐法)、51.0％(CTAB法),且电泳图片显示DNA条带清晰明亮,无明显拖尾现象.因此,三种方法间使用SDS法提取DNA的效果最佳,且加入纯化步骤可进一步提高DNA提取质量.本研究旨在为醉马草的分子生物学研究提供技术支持与科学依据.