妊娠期糖尿病中患者miR-138-5p通过调控缺氧诱导因子1α保护β细胞功能

• 作者: 段亚亭 王晓霜 肖芳 贾虹 黄好
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 妊娠期糖尿病 miR-138-5p HIF-1α INS-1细胞 PI3K/AKT信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 489-497
• 页数: 9页
• 分类号: R965.2|R587
• 语种: 中文
• DOI: 10.12092/j.issn.1009-2501.2020.05.002

摘要

目的:探讨在妊娠期糖尿病(GDM)患者中miR-138-5p对胰岛β细胞功能的影响及其相关作用机制.方法:通过RT-qPCR对比15例GDM患者与15例的正常健康孕妇外周血中miR-138-5p的表达差异;miR-138-5p mimic及inhibitor分别转染入β细胞系INS-1细胞中,过表达或抑制其在该细胞中的表达水平,并通过RT-qPCR验证转染效率;利用MTT增殖实验、Annexin V-FITC凋亡实验及胰岛素释放实验分别检测miR-138-5p对INS-1细胞的增殖、凋亡和胰岛素释放能力的影响;通过miRNA靶基因预测软件TargetScan筛选miR-138-5p的目标靶基因,并利用双荧光素酶基因报告及Western blot实验进行验证;功能挽救实验证实miR-138-5p是否通过靶向调控其目标基因而发挥对INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力影响;Western blot实验检测miR-138-5p在INS-1细胞中作用的分子信号通路.结果:与正常健康孕妇相比,GDM患者外周血中miR-138-5p的表达显著低表达;在INS-1细胞中转染miR-138-5p mimic及inhibitor后可显著促进或抑制miR-138-5p的表达;过表达miR-138-5p可明显促进INS-1细胞的增殖,抑制其发生凋亡并促进细胞对胰岛素的释放能力;而下调miR-138-5p的表达,可显著抑制INS-1细胞的增殖,促进其发生凋亡及抑制细胞的胰岛素释放能力;通过miRNA靶基因预测软件TargetScan筛选缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)为miR-138-5p的目标靶基因,双荧光素酶基因报告实验及Western blot实验提示miR-138-5p可抑制INS-1细胞中HIF-1α 的表达;功能挽救实验证实miR-138-5p通过调控HIF-1α的表达,影响INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力;Western blot实验明确miR-138-5p可能通过靶向调控HIF-1α 的表达,影响PI3K/AKT信号通路中PI3K、AKT及其磷酸化后的p-PI3K、p-AKT蛋白而发挥对INS-1细胞的作用.结论:在GDM患者中,miR-138-5p可能通过靶向调控HIF-1α 的表达,进而影响PI3K/AKT信号通路,促进β细胞的增殖、抑制其凋亡,并促进其胰岛素释放能力从而保护β 细胞的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖芳	重庆市中医院超声科	6	75	5.0	6.0
2	王晓霜	重庆市中医院妇产科	8	66	5.0	8.0
3	贾虹	重庆市中医院妇产科	6	13	2.0	3.0
4	黄好	重庆市中医院妇产科	5	23	3.0	4.0
5	段亚亭	重庆市中医院妇产科	8	9	2.0	2.0