羊口疮病毒间接免疫荧光检测方法的建立

• 作者: 宁梦夏 程红玉 陈德坤 马文涛
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 羊口疮病毒 单克隆抗体 间接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 42-47
• 页数: 6页
• 分类号: S858.26
• 字数: 4635字
• 语种: 中文

摘要

为建立检测细胞培养物和组织切片中羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)的间接免疫荧光(IFA)方法,用已知滴度的ORFV感染牛睾丸上皮细胞,羊口疮病毒单克隆抗体(anti-ORFV mAb)为一抗,荧光素标记羊抗小鼠IgG为二抗,通过反应条件的优化,建立细胞培养物ORFV的IFA检测方法,并制备ORFV感染的山羊唇部组织冰冻切片,对组织中病毒进行检测.结果显示,用牛睾丸上皮细胞增殖的羊口疮病毒TCID50达到10-6.29/0.1 mL,ORFV适宜的接种滴度和培养条件为103.70 TCID50 ORFV接种细胞,37℃、体积分数为5％的CO2恒温箱培养42 h,荧光素标记羊抗小鼠二抗适宜工作浓度为1:400稀释,此时羊口疮病毒单抗应用于IFA检测的特异性和灵敏度最佳,且可应用于病料组织中ORFV的定位检测.表明成功建立了羊口疮病毒单抗检测牛睾丸上皮细胞和组织切片中ORFV的间接免疫荧光方法,有助于ORFV感染的实验室诊断及其在感染细胞中的定位和动态分布研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈德坤	西北农林科技大学动物医学院	100	613	13.0	20.0
2	宁梦夏	西北农林科技大学动物医学院	5	0	0.0	0.0
3	程红玉	西北农林科技大学动物医学院	1	0	0.0	0.0
4	马文涛	西北农林科技大学动物医学院	6	0	0.0	0.0