miR-429对乳腺癌细胞增殖的影响及其作用机制

• 作者: 于超 侯琳 吴琍 纪涵青 陈凤婷 韩清昕
• 来源期刊: 精准医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 微RNAs 低密度脂蛋白受体相关蛋白-1 细胞增殖 荧光素酶类 3'非翻译区 体外研究
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 334-338
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9|R329.25
• 字数: 4531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13362/j.jpmed.202004013

摘要

目的 探讨miR-429对乳腺癌细胞增殖的影响及其具体作用机制.方法 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,根据转染成分不同将细胞分为转染mimics NC组(A组)、空白对照组(B组)、转染inhibitors组(C组)、转染inhibitors NC组(D组)和转染miR-429 mimics组(E组),应用MTT法检测miR-429表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖活力的影响,通过Western blot方法检测miR-429对低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)表达的影响;采用microRNA靶基因预测软件TargetScan 7.1预测miR-429与LRP1潜在的互补结合位点;以pSI-Check2为工具载体构建h-LRP1-3UTR-wt及h-LRP1-3UTR-mu双荧光素酶报告基因质粒,根据转染成分不同将293T细胞分为转染h-LRP1-3UTR-mu与NC mimics组(F组)、转染h-LRP1-3UTR-mu与miR-429 mimics组(G组)、转染h-LRP1-3UTR-wt与NC mimics组(H组)、转染h-LRP1-3UTR-wt与miR-429 mimics组(I组),检测每组293T细胞中荧光素酶的活性,分析miR-429对LRP1的靶向调控作用.结果 MTT实验结果示,在细胞培养的第2～4天,E组细胞的增殖活力明显低于B、C、D组(F=4.53～19.12,P<0.05);Western blot检测结果示,E组细胞LRP1蛋白表达量明显低于A、B、C、D组(F=6.26,P<0.05);TargetScan 7.1软件预测结果显示人miR-429与LRP 1基因3'非翻译区(3'UTR)存在互补结合位点;荧光素酶活性检测结果显示,与H组相比I组细胞荧光素酶活性下调(t=39.78,P<0.01).结论 miR-429通过对LRP1的靶向调控作用来抑制乳腺癌细胞的增殖,其对LRP 1的靶向调控机制是通过与LRP 1基因3'UTR互补结合实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯琳	青岛大学医学部生物化学与分子生物学教研室	64	421	9.0	19.0
2	吴琍	青岛大学附属医院乳腺外科	31	112	6.0	9.0
3	于超	青岛大学附属医院乳腺外科	5	1	1.0	1.0
4	韩清昕	青岛大学附属医院乳腺外科	3	0	0.0	0.0
5	陈凤婷	青岛大学附属医院乳腺外科	2	0	0.0	0.0
6	纪涵青	青岛大学附属医院乳腺外科	1	0	0.0	0.0