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摘要:
[目的]MiRNAs在昆虫变态发育过程中发挥非常重要的作用.对家蚕Bombyx mori miRNAs及靶基因的研究将有助于阐明miRNAs参与调控家蚕变态发育的分子机制.[方法]往家蚕5龄第2天幼虫血淋巴注射蜕皮激素20E后,qRT-PCR检测miR-2769在家蚕脂肪体中的表达;通过生物信息学方法预测家蚕miR-2769的靶基因;利用双荧光酶报告载体系统分析miR-2769与预测靶基因BmE75B的互作;qRT-PCR检测miR-2769及其靶基因BmE75不同剪接体在家蚕不同发育时期(幼虫、蛹和成虫)和幼虫不同组织(头、表皮、丝腺、脂肪体、精巢、卵巢、马氏管、中肠和血淋巴)中的表达量.[结果]研究结果表明,miR-2769可通过与家蚕BmE75B的3'UTR区结合位点的互作,显著抑制荧光素酶报告基因的表达.qRT-PCR结果表明,miR-2769和BmE75A/BmE75B在20E诱导家蚕脂肪体中表达趋势相反.时空表达分析结果表明,miR-2769与BmE75的不同剪接体在家蚕不同发育时期和不同组织中均具有特异性表达特征.在家蚕变态发育的不同阶段,miR-2769和BmE75A的表达量均较低,而BmE75B在蛹期表达量较高,BmE75C在5龄末幼虫和蛹早期有极高表达水平.此外,miR-2769与BmE75不同剪接体均存在一定程度的表达负相关.在家蚕5龄幼虫血淋巴中miR-2769可促进BmE75A的表达,在脂肪体中miR-2769可促进BmE75B的表达,而在其他组织中miR-2769抑制BmE75不同剪接体的表达.[结论]家蚕miR-2769可通过与BmE75B的3'UTR区的互作对BmE75不同剪接体的表达进行负调控.
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文献信息
篇名 家蚕miR-2769靶基因的鉴定及表达分析
来源期刊 昆虫学报 学科 生物学
关键词 家蚕 变态发育 蜕皮激素 miRNAs 靶基因 qRT-PCR 表达分析
年,卷(期) 2020,(3) 所属期刊栏目 生理与生化
研究方向 页码范围 245-254
页数 10页 分类号 Q966
字数 语种 中文
DOI 10.16380/j.kcxb.2020.03.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 阚云超 南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室 32 176 6.0 12.0
2 孙妍妍 郑州大学生命科学学院 2 0 0.0 0.0
4 王露 南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室 2 0 0.0 0.0
7 王景娅 郑州大学生命科学学院 1 0 0.0 0.0
11 李晓哲 南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室 1 0 0.0 0.0
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