镉致肾细胞损伤中氧化应激及N6-甲基腺苷修饰酶表达变化

• 作者: 何作顺 李萌竹 谷仕艳
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: HK-2细胞 氧化应激 甲基转移酶 去甲基化酶 甲基结合蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 897-902
• 页数: 6页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2020.20169

摘要

[背景]N6-甲基腺苷(m6A)修饰酶可参与细胞损伤过程,但m6A修饰酶在镉引起肾细胞损伤中有何变化尚不清楚.[目的]观察CdSO4致肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤过程中m6A修饰酶的变化水平.[方法]以不同浓度CdSO4(0、4、8、16μmol·L-1)处理HK-2细胞24 h后对相应指标进行检测.用Hoechst染色法观察细胞凋亡水平,镜下随机选取视野计数正常细胞和凋亡细胞,计算细胞凋亡率,利用相应试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、丙二醛(MDA)含量,以蛋白免疫印迹法检测m6A甲基转移酶中的甲基转移酶样3(METTL3)和脂肪量与肥胖相关蛋白(FTO)的蛋白表达水平,荧光定量PCR法检测YTH结构域家族蛋白1(YTHDF1)和YTH结构域家族蛋白3(YTHDF3)的mRNA水平.[结果]经0、4、8、16μmol·L-1 CdSO4处理后,细胞凋亡率依次为6.83％、5.17％、21.17％、35.80％;4、8、16μmol·L-1组SOD活性依次是(15.41±0.96)、(13.57±1.42)、(10.96±0.61)×103 U·g-1,与"0"组相比,各组均有降低(P<0.05).GSH-PX活性在CdSO4浓度为8μmol·L-1时降低至(8.74±3.91)U·g-1,而在8、16μmol·L-1 CdSO4作用时,MDA含量分别升高至(87.69±3.05)、(93.42±4.71)μmol·g-1(P<0.05).蛋白免疫印记结果显示,METTL3蛋白相对表达水平在4、8、16μmol·L-1时分别升高至"0"组的1.09、1.25、1.33倍,FTO蛋白相对表达水平在8、16μmol·L-1时分别为0.81和0.74(P<0.05).在CdSO4浓度为4μmol·L-1时,YTHDF1的mRNA水平是"0"组的7.62倍,YTHDF3的mRNA水平在4、16μmol·L-1 CdSO4作用时是"0"组的2.65、2.26倍(P<0.05).[结论]在CdSO4致HK-2细胞发生损伤过程中,m6A修饰酶METTL3和FTO的蛋白水平以及YTHDF1和YTHDF3的mRNA水平发生不同程度的变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何作顺	大理大学公共卫生学院大理大学预防医学研究所	21	18	2.0	3.0
2	李萌竹	大理大学公共卫生学院大理大学预防医学研究所	7	0	0.0	0.0
3	谷仕艳	大理大学公共卫生学院大理大学预防医学研究所	9	2	1.0	1.0