利用RBS序列策略在大肠杆菌中高效合成异戊二烯

• 作者: 娄陈美 于涛
• 来源期刊: 生物技术
• 关键词: 生物合成 异戊二烯 大肠杆菌 核糖体结合位点 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著|Research Paper
• 页码范围: 431-438
• 页数: 8页
• 分类号: Q939.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.05.0068

摘要

[目的]提高现有产异戊二烯大肠杆菌工程菌株合成异戊二烯的产量.[方法]首先对异戊二烯合成酶这一关键酶进行RBS序列优化,提高了异戊二烯的产量;然后通过构建异戊二烯焦磷酸异构酶和异戊二烯合酶的融合蛋白,研究这两个蛋白间的交互作用,将异戊二烯的产量提高了40％;最后通过RBS策略,对甲羟戊酸下游途径的非关键酶进行表达调控,继续提高了异戊二烯的产量.[结果]利用优化RBS序列和融合蛋白策略,异戊二烯的产量最终提高到60 mg/L,比原始工程菌株提高了10倍.[结论]RBS序列优化可能成为菌株代谢工程改造的有力手段.此外,为了提高工程菌株的产量,不仅要关注关键酶,还要关注非关键酶.