苦参碱逆转人结肠癌干细胞化疗耐药作用及相关机制研究

• 作者: 苏建伟 周喜汉 叶颖霞 蒋旗
• 来源期刊: 现代免疫学
• 关键词: 苦参碱 结肠癌 化疗耐药 P-糖蛋白 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 454-459,464
• 页数: 7页
• 分类号: R273
• 语种: 中文

摘要

为探讨苦参碱(matrine,MT)逆转入结肠癌HCT116/5-Fu细胞化疗耐药作用及调控磷酸肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的机制,采用MTT法检测HCT116/5-Fu细胞对5-氟尿嘧啶(5-fuorouracil,5-Fu)的耐药性并确定MT对HCT116/5-Fu细胞的最大无毒浓度(maximum non-toxic concentration,TC0)(抑制率＜10％).将TC0倍比稀释3个浓度,分别为MT高、中、低组,观察MT作用前后HCT116/5-Fu细胞耐药性的变化.采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况,进一步采用实时荧光定量PCR及Western blotting分别检测ABCB1基因及磷酸化PI3K(phospho-PI3K,p-PI3K)、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、磷酸化mTOR(phospho-mTOR,p-mTOR)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达.结果 显示,HCT116/5-Fu细胞对5-Fu的耐药指数为14.53,MT高、中、低组对HCT116/5-Fu细胞化疗耐药逆转指数分别为3.01、1.84、1.27,且MT可改变化疗药5-Fu中HCT116/5-Fu细胞的生存状态;MT各组HCT116/5-Fu细胞的凋亡率分别为(42.41士1.43)％、(23.76±0.47)％、(12.29±0.18)％,显著高于耐药组(P＜0.01);MT可显著降低ABCB1耐药基因和P-gp的表达,并下调p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达(P＜0.05).提示MT可逆转人结肠癌HCT116/5-Fu细胞的化疗耐药,这可能与其降低ABCB1耐药基因和P-gp表达,抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,促进细胞凋亡有关.