肝脏类器官构建及其对小鼠部分肝切除术后肝再生的作用

• 作者: 任昊桢 施晓雷 汤宁 潘晨燕 王经琳 董春龙 蔡佳晖 薛瑞丰 袁献温
• 来源期刊: 肝胆胰外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝脏类器官 肝部分切除术 肝再生 小鼠
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 290-296
• 页数: 7页
• 分类号: R458|R657.3
• 字数: 4198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11952/j.issn.1007-1954.2020.05.009

摘要

目的 观察肝脏类器官对小鼠部分肝切除术后肝再生的作用.方法 体外构建肝脏类器官,通过形态学、PCR和免疫荧光对类器官进行初步鉴定.C57BL/6小鼠随机等分为对照组和治疗组,每组18只.对照组进行肝左叶、中叶切除术+肝包膜注射200μL PBS;治疗组进行肝左叶、中叶切除术+肝包膜移植200μL类器官悬液.建模成功后分别于术后第1、4、7天收集标本.通过血清生化检测、免疫组化和Western blotting评估肝脏类器官对小鼠肝部分切除术后肝再生的作用.结果 类器官体外培养3 d,从直径20μm的囊性结构扩增到约125μm的细胞团(P<0.05),直径扩增近6倍.肝脏干细胞标志基因EPCAM、SOX9和CK19明显上调(P<0.05),传代前后基因保持稳定.免疫荧光显示CK8、Desmin、AFP和PCNA呈阳性.HE显示术后第4天,治疗组肝细胞形态大小基本恢复正常,形态较清晰,无炎症细胞浸润,无脂肪或气球样变.对照组小鼠肝细胞核仁染色加深,仍有炎性细胞浸润,部分区域存在肝细胞坏死区.免疫组化Ki67和Western blotting对增殖水平进行检测,结果显示治疗组增殖能力是对照组的3倍.肝功能检测发现治疗组在术后第4天ALT、AST、TBIL和DBIL明显下降,ALB合成增加(P<0.05).结论 具有肝脏干细胞属性和增殖能力的肝脏类器官,能通过保护肝细胞、改善部分肝切除术后小鼠肝功能,发挥促进肝再生作用.