植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建

• 作者: 方来杉 赖强 钟泽民 黄毓茂
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 隐蔽性质粒 滚环复制 穿梭质粒 植物乳杆菌
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 118-124
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 6649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20181130-361

摘要

目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用.方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析.通过质粒pLP3复制子,与pCPSP载体的氯霉素基因CmR、pUC19的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒.在穿梭质粒的基础上加上嗜酸乳杆菌的S层蛋白启动子PslpA和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,eGFP)基因,进一步构建乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP.结果:从植物乳杆菌LP3中得到一个天然隐蔽性质粒pLP3,该质粒大小为2017 bp,GC含量为37.48％.基于质粒pLP3,构建了大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒D-pLP3,并成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于0.3×102～1.0×103 CFU/μg(DNA质量计)之间.乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP转化至植物乳杆菌,成功获得了荧光蛋白的表达.结论:成功构建了乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA,为乳酸菌基因操作提供了新的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄毓茂	华南农业大学兽医学院	72	520	12.0	20.0
2	方来杉	华南农业大学兽医学院	2	0	0.0	0.0
3	赖强		1	0	0.0	0.0
4	钟泽民		1	0	0.0	0.0