莲草直胸跳甲不同发育阶段内参基因的筛选与验证

• 作者: 刘艳红 张彬 纪周瑜 袁晓芳 贾栋 马瑞燕
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: 实时荧光定量PCR 内参基因 莲草直胸跳甲 验证
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 53-58
• 页数: 6页
• 分类号: Q751|S451.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13842/j.cnki.issn1671-8151.202001022

摘要

[目的]实时定量PCR(qPCR)是基因表达研究的重要技术手段,但其结果的准确性取决于内参基因,本研究筛选莲草直胸跳甲不同发育阶段稳定表达的内参基因,为后续基因表达研究奠定基础.[方法]使用qPCR测定了9个昆虫常见的候选内参基因(β-actin、RPL13a、RPS18、UBC、EF-1α、RPS6、GAPDH、α-Tubulin和β-Tubulin)在莲草直胸跳甲不同发育阶段的表达,利用ΔCt、geNorm、NormFinder和BestKeeper 4种程序综合评估了9个内参基因的表达稳定性,并用小分子热激蛋白基因(shsp20.8)对内参基因的稳定性进行了验证.[结果]莲草直胸跳甲不同发育阶段的最适内参基因为RPS18和RPL13a,shsp20.8在使用最稳定和最不稳定的内参基因用于数据标准化时,结果差异显著,表达量最高的虫态分别为卵和蛹期.[结论]本文证实了稳定的内参基因对qPCR试验结果准确性至关重要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彬	山西农业大学园艺学院	34	150	6.0	11.0