北美洲流行汉坦病毒多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 李乃哲 李建东 李德新 李阿茜 梁米芳 王世文
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 四重实时荧光定量RT-PCR 牛轭湖病毒(BAYV) 纽约病毒(NYV) 厄尼诺洛峡谷病毒(ELMCV) 岛景病毒(ISLAV)
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒检测方法研究专题论著
• 页码范围: 617-623
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003767

摘要

为了建立牛轭湖病毒(Bayou virus,BAYV)、纽约病毒(New York virus,NYV)、厄尼诺洛峡谷病毒(El Moro Canyon virus,ELMCV)以及岛景病毒(Isla Vista virus,ISLAV)四种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术,本研究选用上述四种病毒的N蛋白基因作为靶标区域设计四组特异性引物探针,建立四重实时荧光定量RT-PCR检测方法.用四种病毒体外转录RNA进行灵敏度和重复性验证,并使用其他病毒细胞培养物及体外转录RNA进行特异性验证.结果 显示,四重实时荧光定量PCR扩增效率均可达到95％以上,四种病毒体外转录RNA灵敏度介于1～10拷贝/μL,与单重检测方法无明显差异,且与其他病毒无交叉反应.稳定性评价结果显示,批内、批间变异系数均在3％以内.本研究所建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于相关样本的诊断与筛查.