摘要:
目的 利用3D TableTrixTM干细胞微载体培养脐带来源间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs),并进一步评价其修复兔膝关节软骨缺损的效果.方法 将UC-MSCs在3D TableTrixTM体系中培养7d后,评价细胞活力并通过细胞形态观察、三向分化以及流式细胞术进行干细胞鉴定.通过植入裸鼠皮下进行病理组织学观察,进一步评价3D TableTrixTM体系的生物安全性.将12只新西兰大白兔制作双膝关节股骨滑车软骨缺损模型,后随机分为两组:对照组,不予任何治疗;UC-MSCs组,置于载有UC-MSCs的3D TableTrixTM(UC-MSCs组).于术后3、6个月分别取材,进行大体观察、HE染色、甲苯胺蓝染色、Masson染色并对比观察,并依照国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society,ICRS)大体观和组织学评分对再生组织的进行定量评价.结果 UC-MSCs在3D TableTrixTM体系中存活良好,培养7d后活死染色未见明显死细胞,且在三维支架内部实现了明显增殖.将细胞消化后进行鉴定,证实细胞保持了其作为干细胞的特征.裸鼠皮下植入28 d后,见团块形成,外有纤维包膜包裹.HE染色可见3D TableTrixTM支架结构完整并有新生血管长入.在体内研究中,将3D TableTrixTM填充软骨缺损区域,经过3个月和6个月的观察,显示UC-MSCs组的软骨修复效果优于对照组,且3个月及6个月的ICRS大体观评分分别为(8.50±0.58)分和(11.25±0.96)分,高于对照组(4.50±0.58)分和(8.75±0.50)分,差异均有统计意义(P<0.05);3个月及6个月的组织学评分分别为(11.00±2.16)分和(17.00±0.82)分,亦高于对照组的(5.25±0.50)分和(11.25±0.96)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 3D TableTrixTM干细胞微载体为干细胞培养提供了理想的微环境,并可以用于软骨缺损的治疗.