PEG介导的柱状田头菇遗传转化体系建立

• 作者: 崔祥华 柴红梅 赵永昌 陈卫民 陶南 马渊浩
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 柱状田头菇 PEG介导转化 潮霉素 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1100-1108
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.200068

摘要

柱状田头菇(茶树菇)Agrocybe aegerita是一种美味的食用菌,具有极高的经济价值.随着其全基因组测序的完成,功能基因组学研究也逐渐展开,其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点.本研究以柱状田头菇原生质体为受体、潮霉素抗性基因(hph)作为筛选标记,以增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)为报告基因,应用PEG介导法进行柱状田头菇遗传转化体系研究.结果 表明,150μg/mL潮霉素可以完全抑制柱状田头菇的生长.30℃下用2％裂解酶液酶解菌丝3h,能够获得最大得率的原生质体.通过PEG介导将构建好的DNA片段转化入柱状田头菇原生质体,通过潮霉素抗性筛选获得转化子,转化得率达到7个/μ-g DNA.PCR验证和荧光显微镜观察,外源片段成功转入柱状田头菇中并稳定表达.本研究建立的PEG介导转化体系,为柱状田头菇基因功能研究提供了技术基础.