溺死相关浮游生物基因座的复合扩增体系

• 作者: 刘向东 刘宏 刘超 彭帆 徐曲毅 朱晓琳 李越 肖成 赵鹏 韩雅莉
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医病理学 溺死诊断 复合扩增 浮游生物
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-25
• 页数: 6页
• 分类号: DF795.1
• 字数: 4068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13618/j.issn.1001-5728.2020.01.004

摘要

目的 构建溺死相关浮游生物基因座的复合扩增体系,验证体系特异性并评估其在法医溺死诊断中的应用价值.方法 针对溺死相关浮游生物同源基因序列,设计特异性引物,并用FAM、HEX、TAMRA、ROX、SIZ荧光染料分组标记,构建复合扩增体系;进行体系特异性验证;以16例实验猪样本评估体系检验效能;复合扩增体系、硅藻形态学MD-VF-Auto SEM检测法及硅藻rbcL基因PCR-CE检测法分别检测28例案件样本,比较分析应用效果.结果 该复合扩增体系共包含14个基因座,可特异性扩增35种浮游藻类和3种浮游细菌,人、3种人体共生菌及8种浮游细菌均为阴性.以该体系检测溺死实验猪,阳性率为90％,非溺死实验猪均未检出;检测溺死案件样本,阳性率为96％,非溺死案件均未检出.复合扩增体系与MD-VF-Auto SEM法检测案件尸体肺、肝和肾的阳性率均不具有统计学差异(P>0.05),但其与硅藻rbcL基因PCR-CE法检测案件肝和肾的阳性率均具有统计学差异(P<0.05).结论 本文针对多种溺死相关浮游生物14个基因建立的复合扩增体系,具备多种靶物种的特异性遗传标记,且所需检材量小,提高了检测效能,在法医溺死鉴定中具有良好的应用前景.