CLCN2基因突变者尿液来源诱导多能干细胞的构建及定向分化神经细胞

• 作者: 刘佳 彭福华 甘周庆 谢冰冰 钟秀风 陈灼林
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: 诱导多能干细胞 CLCN2 白质脑病 神经分化
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 581-589
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2020.08.003

摘要

目的 建立和鉴定CLCN2基因突变患者尿液来源特异诱导多能干细胞(iPSC),并初步探讨其神经分化能力.方法 收集临床上1例CLCN2基因突变患者尿液细胞,将表达重编程因子OCT4、SOX2、KLF4和SV40LT的附加型载体通过电转染导入尿液细胞,使其重编程为iPSC,并继续诱导其神经分化.通过Sanger测序、核型鉴定、免疫荧光、逆转录PCR、畸胎瘤实验及定向分化等评价干细胞和神经细胞特性.结果 电转后部分尿液细胞发生形态改变,形成边界清楚的致密细胞克隆团;这些克隆状生长的细胞可以连续传代,具有正常核型,含有CLCN2基因无义突变,表达多能干性标记且无外源基因;裸鼠体内形成三胚层畸胎瘤;体外可定向诱导分化为神经干细胞和星形胶质细胞.结论 CLCN2基因突变患者尿液细胞可重编程为iPSC,并可体外分化为神经细胞,可为CLCN2基因突变相关疾病的研究提供重要材料.