污染严重的海带配子体分离纯化

• 作者: 李晓捷 武瑞娜 罗世菊 赛珊 赵聚萍
• 来源期刊: 河北渔业
• 关键词: 海带(Saccharina japonica ) 配子体 液相培养 固相培养 分离纯化
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 苗种繁育
• 页码范围: 36-51
• 页数: 16页
• 字数: 1343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-6755.2020.06.010

摘要

针对海带(Saccharina japonica )配子体保存过程中严重污染材料的分离纯化进行研究. (1 )液相培养分离纯化法:将克隆材料经超声波细胞粉碎仪打碎后重新附着到 90 mm培养皿中,利用微毛细吸管在显微镜下分离出状态好且无菌丝附着的细胞段,继续保存.(2)固相培养分离纯化法:将克隆材料 4 000 r/min离心 5~1 0 min,弃上清,加灭菌PESI培养液重新悬浮藻液,利用 5 mL无菌注射器吸取 2 mL粉碎后的配子体细胞,逐点注射入固相平板上,接种后利用Parafilm封口膜密封培养皿,平板培养约 60~120 d 后观察,将未长出菌落且藻斑直径达 2 mm的克隆团挑出,然后在PESI液体培养基中复苏继续保存.