小鼠胚胎大脑皮质活化和静息神经干细胞的初步分离与鉴定

• 作者: 李莲莲 李雪 涂晓萌 罗祖强
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 静息 活化 细胞增殖 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1396-1403
• 页数: 8页
• 分类号: R741.02|R363.2
• 字数: 4511字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.08.008

摘要

目的:从小鼠胚胎大脑皮质中分离并鉴定静息和活化的神经干细胞.方法:通过流式细胞术,从胚胎14.5 d的小鼠大脑皮质中分选出大小不同的细胞团;利用免疫荧光技术检测神经干细胞标志物Pax6以及增殖标志物Ki67的表达变化;借助RT-qPCR分析两组细胞中干细胞标志基因Pax6、Oct4、Sox2和Nanog的表达情况;采用流式细胞术及RT-qPCR分析两组细胞所处的周期;体外培养对大、小细胞组进行增殖能力检测.结果:免疫荧光结果表明,分离出的两类细胞均表达Pax6,且大细胞组Ki67为阳性,小细胞组为阴性.细胞周期分析显示,小细胞组G0/G1期比例高于大细胞组,而G2/M期为0,且cyclin A和cyclin B的表达显著低于大细胞组(P<0.05).体外培养显示,相对于大细胞,小细胞形成的微球数量少,速度慢;大、小细胞形成的微球消化后,Pax6和Ki67染色均阳性,且阳性率无显著差异(P>0.05).结论:大、小细胞团分别为活化和静息的神经干细胞.活化的干细胞具有较强的增殖能力,而静息干细胞自我复制与增殖能力较差.在体外培养条件下,静息的神经干细胞可以被转激活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗祖强	温州医科大学附属第一医院病理科	6	23	3.0	4.0
2	涂晓萌	温州医科大学附属眼视光医院眼视光学和视觉科学国家重点实验室	4	3	1.0	1.0
3	李雪	温州医科大学附属眼视光医院眼视光学和视觉科学国家重点实验室	4	0	0.0	0.0
4	李莲莲	温州医科大学附属眼视光医院眼视光学和视觉科学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0