聚乙二醇诱导鸡红细胞融合实验方案的优化

• 作者: 刘欢 唐慧 崔林 张亮 张君 李玲 贺亚玲
• 来源期刊: 农垦医学
• 学科: 医学
• 关键词: 聚乙二醇 细胞融合 鸡红细胞 缓冲体系 pH 时间 染色剂
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 教育与医院管理
• 页码范围: 164-169
• 页数: 6页
• 分类号: G642.423|R394-33
• 语种: 中文

摘要

目的:聚乙二醇(PEG)介导的细胞融合法是最为经济、简单的细胞融合技术,但受多种因素影响,实际实验效果并不理想,为获得高效稳定的细胞融合效率,本研究拟对PEG诱导的鸡红细胞的融合实验进行优化.方法:调整鸡红细胞的采集与保存方式、细胞浓度、缓冲系统(GKN与1640)、pH、诱导与孵育时间,以及染液的选择等.结果:弱碱PEG环境(pH≈7.8)下诱导与孵育时间均采用5min时,细胞融合率最高(17.87％),显著高于未调节pH组及诱导与孵育时间20min组(P＜0.01);pH＞8时,细胞聚集但胞膜皱缩破裂,计算融合率困难;亚甲基蓝、中性红染色时间＞20min时,细胞膜亦皱缩破裂.结论:宜选择肝素类抗凝管采集及保存鸡血,在GKN或1640缓冲系统中,以全血与试剂1:9比例洗涤及孵育,弱碱PEG环境(pH≈7.8)分别诱导、孵育5min,并在20 min内观察亚甲基蓝或中性红染色结果,该方案适宜应用于PEG诱导的鸡红细胞融合实验教学.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玲		47	107	6.0	8.0
2	唐慧		21	43	4.0	6.0
3	张君		27	86	5.0	8.0
4	贺亚玲		17	31	4.0	5.0
5	崔林		19	115	7.0	10.0
6	张亮		13	30	4.0	5.0
7	刘欢		14	18	2.0	4.0