14型蓝舌病病毒VP7蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

• 作者: 印春生 姚文生 孙雯 张莹辉 曹雨 朱真 李启红 杜吉革 钱莺娟 陈小云
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蓝舌病病毒 VP7蛋白 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 42-48
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.01.08

摘要

为建立蓝舌病(bluetongue,BT)的血清学诊断方法,本研究通过得到14型蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的s7基因,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,原核表达得到VP7蛋白,并对表达的包涵体VP7蛋白进行纯化,Western blot分析表明,纯化的VP7蛋白具有良好的抗原性.以纯化的VP7蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法.该方法与羊痘阳性血清,羊口蹄疫阳性血清和羊的小反刍兽疫阳性血清均无交叉反应,与中和试验比较,两者符合率为90％,ELISA批内和批间重复性试验显示,D值的变异系数小于10％.说明本方法具有良好的特异性和重复性.本研究在国内首次建立了14型BTV抗体间接ELISA方法,可用于BTV感染的流行病学调查以及疫苗接种动物的抗体水平监测,为以后相关BTV ELISA检测试剂盒研发提供技术平台.