小泛素样修饰蛋白通路在骨肉瘤中异常激活与靶向治疗的研究

• 作者: 于康 张瑾 张超 李丽丽 王国文 韩秀鑫 马育林
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 关键词: 骨肉瘤 分子靶向治疗 间质干细胞 肿瘤,实验性
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 864-872
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121113-20190811-00337

摘要

目的 运用分子生物学方法观察小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)通路成员在骨肉瘤中的表达特点,为基于蛋白质SUMO化修饰的靶向治疗提供理论依据.方法 收集2017年1月至2019年6月于我院就诊并手术的新鲜骨肉瘤组织样本18例,经Western blot及免疫组织化学方法检测癌灶及癌旁SUMO通路核心成员SUMO1、SAE1、Ubc9、SENP1的蛋白表达水平.分别干涉SUMO1、干涉UBC9及过表达SENP1,进行如下分组:空白对照组、对照组、siR-SUMO1组、siR-Ubc9组和SENP1组.Western blot验证基因转染效率,细胞增殖检测试剂盒检测EdU的阳性表达率,划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.以骨髓间充质干细胞(BMSCs)为研究对象,评估三种治疗方案的副作用.结果 Western blot及免疫组织化学结果均显示,骨肉瘤组织中SUMO1、SAE1、Ubc9的蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P＜ 0.05),但SENP1明显低于癌旁组织.基于143B骨肉瘤细胞的实验结果表明,siR-SUMO1组、siR-Ubc9组、SENP1组均能够明显抑制骨肉瘤细胞中SUMO通路的活化,表现为较对照组和无义组更低的肿瘤细胞增殖率(P＜0.05),更低的细胞迁移和侵袭能力(P＜0.05),以及更高的细胞凋亡率(P＜0.05);然而基于BMSCs的实验结果表明,siR-SUMO1组和siR-Ubc9组能够明显抑制BMSCs的增殖,诱导细胞凋亡,表现出极大的治疗副作用,但SENP1组对BMSCs的增殖和凋亡几乎没有影响(P＞0.05).结论 SUMO通路在骨肉瘤中被异常激活,外源性补充或内源性激活SENP1是靶向治疗的备选方案之一.