Ang-2表观遗传学修饰在压力介导的椎间盘退变中的作用机制研究

• 作者: 冯晶 周鹃 夏平 李艳丽 汪朋 王志伟 赵晓龙 陈永杰
• 来源期刊: 生物骨科材料与临床研究
• 学科: 医学
• 关键词: 椎间盘退变 压力 血管生成素2 表观遗传学修饰 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5972.2020.06.003

摘要

目的 研究血管生成素-2 (Angiopoietin-2,Ang-2)表观遗传学修饰在压力介导的人椎间盘退变中的作用及其作用机制.方法 取脊柱侧弯和腰椎间盘突出症患者的椎间盘组织,分离出正常和退变的髓核细胞.将正常及退变髓核细胞放入0 MPa的压力环境下(正常空白组及退变空白组),将正常及退变髓核细胞放入1 MPa的压力环境下(正常压力组及退变压力组),24 h后用逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)、蛋白质印迹法(Westem Blot)检测上述4组髓核细胞中靶基因Ang-2、酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ)和性别决定基因盒转录因子9(sex-determing region ofY chromosome-box transcription factor9,Sox-9)转录、翻译的表达量.将正常髓核细胞分为3组:空白组、压力组和5-氮杂胞苷组.处理24 h后测量上述指标及MTT法测髓核细胞的活性.结果 压力刺激引起髓核细胞中Aggrecan、Collagen Ⅱ和SOX-9表达水平的减少,但Ang-2和Tie-2表达量增加;退变髓核细胞和正常髓核细胞,以及压力诱导组和一般对照组中,Ang-2的表达都明显增高;DNA甲基化抑制剂可减少压力诱导的髓核细胞中Ang-2、Tie-2的转录和翻译,差异具有统计学意义.MTT检测结果表明,在压力刺激下细胞活性明显下降,DNA甲基化抑制剂延缓压力诱导的髓核细胞活性的下降,差异具有统计学意义.结论 以过度压力为特征的髓核细胞外环境发生改变,导致了Ang-2表观遗传修饰状态改变,从而发生过表达,进而诱发了髓核细胞活性的下降以及其细胞外基质的降解,最终加速椎间盘退变.