稳定表达非洲猪瘟病毒P54蛋白的Vero细胞系的建立

• 作者: Grzegorz Wozniakowski 冯春燕 吴绍强 杜方原 林祥梅 王勤 王彩霞
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 P54蛋白 Azami绿色荧光蛋白 Vero细胞 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 139-144
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-1099

摘要

旨为建立稳定表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P54蛋白的Vero细胞系,将ASFV-P54基因与绿色荧光基因Azami Green的融合基因片段,将其克隆至慢病毒载体pLV-puro中构建重组慢病毒质粒pLV-ASFV-P54-AG,将该质粒与慢病毒包装质粒pH1和pH2共转染HEK-293V细胞,包装表达ASFV-P54蛋白的慢病毒.将重组慢病毒在聚凝胺(Polybrene)的介导下感染Vero细胞,筛选出一株稳定表达ASFV-P54蛋白的Vero细胞系,命名为Vero-AG-ASFV-P54.间接免疫荧光试验表明,该细胞系能够与P54多克隆抗体反应;经波兰国家兽医研究所进一步验证,结果显示,该细胞系与ASFV抗体阳性血清也能发生反应,并且与阴性血清无反应.结果表明,Vero-AG-ASFV-P54细胞系能够稳定高效的表达具有生物活性的ASFV-P54蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林祥梅	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	135	890	13.0	26.0
2	吴绍强	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	123	615	14.0	21.0
3	王彩霞	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	28	95	5.0	9.0
4	冯春燕	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	23	70	5.0	7.0
5	杜方原	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	8	16	3.0	3.0
6	王勤	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	13	6	2.0	2.0