河弧菌paar基因功能研究

• 作者: 刘平 刘笑舒 张安冉 梁未丽 阚飙 韩雨 黄元铭
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 河弧菌 Ⅵ型分泌系统 PAAR Hop 转录调控
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 294-300
• 页数: 7页
• 分类号: R378.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.04.006

摘要

目的 研究河弧菌85003 Ⅵ型分泌系统VflT6SS2核心基因簇上游aar基因(AL536_RS29530)编码蛋白的结构特征、功能及其对河弧菌VflT6SS2功能的影响.方法 利用自杀质粒介导的同源重组技术构建paar基因缺失株,PCR扩增并克隆paar基因于pSRKTc表达载体获得回补质粒,导入相应缺失株得到回补株.Western Blot(WB)检测缺失株和回补株中T6SS效应蛋白Hcp的表达和分泌,细菌杀菌实验检测菌株杀菌毒力变化.荧光定量反转录聚合酶链式反应检测tssB2和hcp mRNA表达水平.启动子-Lux报告系统的冷光表型检测确定VflT6SS2核心基因簇启动子及hcp启动子在野生株和缺失株背景下的活性差异.结果 成功构建河弧菌85003的paar基因的精确缺失株和相应的回补株;WB检测缺失株中Hcp的表达和分泌较野生株明显降低,同时其对大肠埃希菌的菌间杀伤能力也降低,导入相应回补质粒可使缺失株Hcp的表达、分泌和杀菌表型恢复到野生株水平;hcp和tssB2的mRNA水平检测显示缺失株低于野生株,差异有显著性,但VflT6SS2核心基因簇的启动子活性和hcp启动子活性在野生株及缺失株中无明显差异,提示paar基因可能在转录后水平调控VflT6SS2.结论 河弧菌中paar(AL536_RS29530)基因编码产物是河弧菌VflT6SS2的组成部分,为其功能所需,缺失该基因导致VflT6SS2的分泌和杀菌能力缺陷,但其具体的调控机制有待进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阚飙	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	120	614	11.0	19.0
2	梁未丽	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	11	120	3.0	10.0
3	黄元铭	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	5	3	1.0	1.0
4	刘笑舒	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	0	0.0	0.0
5	张安冉	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	0	0.0	0.0
6	刘平	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	0	0.0	0.0
7	韩雨	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	0	0.0	0.0