CD 3/KIF20A双特异性抗体介导T淋巴细胞对KIF20A阳性胰腺癌PANC1细胞的抗肿瘤效应

• 作者: 冯慧晶 刘鹏敏 张俊萍 杨晓玲 薛昭君 贾原
• 来源期刊: 中华胰腺病杂志
• 关键词: 胰腺肿瘤 驱动蛋白 抗体，双特异性 T淋巴细胞 ADCC效应
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 424-428
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115667-20200310-00034

摘要

目的:探讨胰腺癌双特异性抗体诱导特异性T淋巴细胞的效应及其对KIF20A阳性表达的胰腺癌PANC1细胞系的杀伤作用。方法:采用化学交联的方法，经凝胶分子排阻Sephrose-G25层析纯化，制备CD 3/KIF20A双特异性抗体(双抗)并浓缩。采集健康志愿者外周血，采用淋巴细胞分离液分离出单核细胞，再分别培养为树突样细胞(DC)及T细胞，并联合培养为DC-T细胞，同时应用维生素C干预DC-T细胞(vcDC-T细胞)。采用流式细胞仪检测各组T细胞亚群及培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-12水平。将10、50、100、300 ng双抗装载的1×10 5个T细胞、DC-T细胞、vcDC-T细胞与PANC1细胞(20∶1)共培养2、6、10 h后，明确杀伤率最高的双抗装载剂量；将DC-T细胞及装载杀伤率最高的双抗剂量的DC-T细胞、vcDC-T细胞与PANC1细胞(20∶1)共培养2、4、6、8、10、12 h，倒置显微镜下观察效应细胞对靶细胞的聚集效应，乳酸脱氢酶(LDH)法检测肿瘤细胞杀伤率。 结果:CD 3/KIF20A双抗经SDS凝胶电泳鉴定，其分子质量为130 000。与DC-T细胞比较，vcDC-T细胞的CD 8＋CD 28＋及CD40L亚群比例增加[(47.6±15.8)%比(38.2±7.6)%，(52.1±4.9)%比(44.7±3.2)%]，负性调节细胞Treg比例降低[(4.3±0.8)%比(8.3±1.1)%]，分泌的IL-2、IFN-γ、IL-12增加[(201.2±17.3)ng/L比(163.4±13.1)ng/L，(303.3±22.6)ng/L比(221.8±17.6)ng/L，(190.4±11.7)ng/L比(80.3±8.6)ng/L]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；显微镜下可观察到100 ng CD 3/KIF20A双抗装载T细胞对KIF20A ＋胰腺癌PANC1细胞有明显的靶向性，有最强的杀伤力。效靶细胞比20∶1、共培养4 h时，双抗vcDC-T细胞对PANC1细胞的杀伤率为(88.6±2.6)%，显著高于双抗DC-T组的(68.4±3.4)%及DC-T组的(39.2±2.1)%，杀伤率分别提高20%及45%以上。 结论:CD 3/KIF20A双特异性抗体装载的DC-T细胞能显著提高对KIF20A阳性表达的胰腺癌PANC1细胞的杀伤率，维生素C干预后更进一步增强对双抗装载T细胞的细胞杀伤能力。