miR-25在肝癌细胞中激活Wnt/β-catenin信号通路的机制研究

• 作者: 林春城 苏子剑 谢建立
• 来源期刊: 肿瘤药学
• 学科: 医学
• 关键词: mircoRNA 肝癌细胞 Wnt/β-catenin信号通路 miR-25
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 545-551
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1264.2020.05.07

摘要

目的 观察miR-25在肝癌细胞中的表达及生物学作用,并探讨其对Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 检测肝癌临床样本中miR-25的表达情况,并分析其与肝癌患者临床病理资料的相关性.检测miR-25对肝癌细胞恶性增殖的调控作用,在此基础上利用慢病毒载体分别在肝癌细胞HepG2、HuH7中构建miR-25过表达及低表达细胞株,采用TOP/FOP荧光素酶试验检测Wnt/β-catenin信号通路的活性变化;Real-time PCR检测Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达情况;Western blotting检测细胞核内β-catenin蛋白表达情况.结果 miR-25在肝癌组织及转移灶中呈高表达,其表达水平与肝癌的转移密切相关.过表达miR-25可促进肝癌细胞恶性增殖,而抑制miR-25表达可抑制肝癌细胞恶性增殖.进一步研究显示,过表达miR-25可显著增加肝癌细胞中TOP/FOP荧光比值,上调Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因mRNA和肝癌细胞核内β-catenin蛋白的表达;反之,抑制miR-25表达可降低TOP/FOP荧光比值,下调Wnt/β-catenin通路下游靶基因mRNA和细胞核内β-catenin蛋白的表达.结论 miR-25在肝癌发生发展过程中发挥癌基因作用,可激活肝癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路,有望成为抗肝癌治疗新的潜在靶点之一.