食品级高产亮氨酸氨肽酶重组Bacillus subtilis的构建和发酵优化

• 作者: 刘德华 张大伟 田亚平 黄钦钦
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 亮氨酸氨肽酶 D-丙氨酸消旋酶 枯草芽孢杆菌 食品级表达 发酵优化
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 字数: 4772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023374

摘要

为解决枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在发酵产亮氨酸氨肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)需额外添加抗生素的问题,该研究构建了1株食品级产LAP重组B.subtilis.首先通过Cre/lox系统敲除B.subtilis 168基因组中D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到缺陷型菌株BS168(dal)-.其次使用高斯组装的方法构建以dal作为标记基因的质粒pMA5-lap-dal(AmpR,Ori)-并转化至BS168(dal)-中得到食品级重组菌BS168(dal)-/pMA5-lap-dal(AmpR,Ori)-.该工程菌发酵产LAP无需添加抗生素且不含抗性基因.对该菌株进行5 L发酵罐条件优化,在转速300 r/min、温度33℃、pH 7.0、分阶段补料的条件下,酶活最高达到302 U/mL.结果表明,构建的食品级重组B.subtilis产LAP具有潜在的工业应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田亚平	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	72	388	11.0	15.0
2	张大伟	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	4	14	2.0	3.0
3	刘德华	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
4	黄钦钦	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0