蚕豆中三叶草黄脉病毒编码的NIa-Pro蛋白亚细胞定位特征初步研究

• 作者: 吴淑华 周益军 季英华 崔晓艳 干射香 朱月林 涂丽琴 程兆榜 范小燕 赵文浩 陈新
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蚕豆 三叶草黄脉病毒 核内涵体a蛋白酶 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 153-160
• 页数: 8页
• 分类号: S643
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2019-0255

摘要

三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,C1YVV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的重要成员.核内涵体a蛋白酶(Nuclear Inclusion a Protease,NIa-Pro)是一种由Potyvirus病毒编码的具有蛋白水解酶活性的蛋白,在病毒与寄主互作过程中参与多聚蛋白切割等多种功能的行使.选择2018年在江苏发现的C1YVV蚕豆分离物作为研究对象,对其NIa-Pro蛋白基因进行了克隆和序列测定,结果显示其全长729 bp,编码1个24.3 kD的蛋白.为进一步研究其亚细胞定位特征,构建了融合YFP荧光标签的重组表达载体YFP-NIa-Pro,利用农杆菌浸润法接种本氏烟(Nicotiana benthamiana).激光共聚焦显微镜观察结果显示,浸润处理后本氏烟叶片表皮细胞的细胞质及细胞核都有较强的荧光信号.取浸润区样品通过Western-blot检测,结果显示YFP-NIa-Pro在本氏烟叶片中正常表达.这些结果初步表明C1YVV编码的NIa-Pro在细胞质和细胞核均有分布.