JAK1/STAT3协同TGF-β/Smad2/3信号通路调控TSLP对突出椎间盘重吸收的影响

• 作者: 李峰 杨学军 王志浩 王文磊 田静 祝勇 达逸峰 邢文华 郑文凯 黄智
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 关键词: 白细胞介素6 椎间盘退行性变 动物实验
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 734-742
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121113-20200302-00124

摘要

目的 探讨白介素-6(interleukin-6,IL-6)介导酪氨酸激酶1/信号转导子与转录激活子3(januskinase 1/signal transducer and activator of transcription3,JAK1/STAT3)通路及转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad通路通过调节胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)的表达从而促进突出椎间盘重吸收的机制.方法 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞及大鼠髓核细胞,分别使用大鼠IL-6重组蛋白、STAT3抑制剂、Smad2/3抑制剂处理培养细胞,使用实时荧光定量PCR技术检测不同条件下JAK1、STAT3、Smad2、TSLP mRNA表达情况;通过免疫印记试验(Western blot)检测不同条件下TSLP、Smad2及磷酸化STAT3蛋白的表达情况;使用酶联免疫吸附测定法检测IL-6作用下大鼠两种细胞中TGF-β的表达情况.结果 大鼠骨髓间充质干细胞中IL-6刺激下JAK1的相对表达量为10 ng/ml组5.13±1.21,100 ng/ml组5.23±0.35,对照组为0.97±0.03;STAT3相对表达量为10 ng/ml组6.50±0.38,100 ng/ml组6.74±0.61,对照组0.87±0.19,较对照组的表达水平均明显升高;同时TSLP也呈现高表达,10 ng/ml组4.26±0.38,100 ng/ml组5.05±0.46,对照组为1.04±0.04.大鼠髓核细胞中STAT3相对表达量为10 ng/ml组2.91±0.08,对照组1.12±0.11;10 ng/ml组TSLP相对表达量为7.32±0.37,对照组1.03±0.03,较对照组的表达水平均明显升高.使用IL-6刺激后观察到大鼠骨髓间充质干细胞中Smad2表达升高,10 ng/ml组15.92±0.62,100 ng/ml组20.28±0.58,对照组0.96±0.08;大鼠髓核细胞中Smad2表达升高,其中10 ng/ml组5.01±0.17,对照组0.96±0.03.加入STAT3抑制剂(BP组)后大鼠骨髓间充质干细胞中TSLP表达下降,BP组0.17±0.01,对照组0.90±0.09;大鼠髓核细胞中TSLP表达同样下降,BP组0.42±0.11,对照组0.90±0.11.加入Smad2/3抑制剂(SB组)后大鼠骨髓间充质干细胞中TSLP表达下降,SB组0.33±0.01,对照组1.02±0.02;大鼠髓核细胞中TSLP表达同样下降,SB组0.40±0.04,对照组0.99±0.01.结论 IL-6/JAK1/STAT3通路与TGF-β/Smad2/3通路协同上调TSLP的表达,进而促进突出椎间盘的重吸收过程.