耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ftsZ基因高效反义肽核酸序列筛选及其体外抗菌活性观察

• 作者: 刘华伟 夏云 杨莉莉 梁树梅
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ftsZ 义寡核苷酸 斑点杂交
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 微生物药物筛选
• 页码范围: 867-872
• 页数: 6页
• 分类号: R978.1
• 语种: 中文

摘要

目的 筛选出能与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ftsZ基因紧密结合的反义肽核酸序列,评价其体外抗菌活性.方法 选用两种计算机软件(Mfold、RNA Structure 5.2)和斑点杂交筛选出最佳反义序列PNA,并连接穿膜肽(cell penetrating peptide,CCPs)形成肽-PNA(peptide-PNA,PPNA),另设一条与最好序列有3个错配碱基的肽核酸序列作为对照,连接穿肽形成错配的肽肽核酸(scrambled peptide-PNA, Scr PPNA).将不同浓度的肽肽核酸处理MRSA后,间隔1h测定A600值同时做平板菌落计数,观测其对细菌生长的抑制作用.结果 斑点杂交实验结果表明,计算机辅助软件设计的11条反义寡核苷酸序列中,有4条序列显示强弱不同的杂交信号,第3号探针杂交信号最强,而1条正义序列没显示任何信号,PPNA在30和40μmol/L分别具有抑菌作用和杀菌作用,并具有浓度依赖性,而Scr PPNA在高浓度时对细菌也无生长抑制作用,验证了肽核酸的特异性.结论 成功的筛选出一条在体外对MRSA的生长有显著的影响的反义肽核酸序列,有望为抗MRSA感染患者提供新的治疗方案.