含RGD肽类弹性蛋白制备及促HUVECs细胞黏附的影响

• 作者: 关新刚 刘宇轩 崔梅英 杨泽斌 王冬梅 王明月 陈丽 黄莉莉
• 来源期刊: 北华大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 类弹性蛋白多肽 RGD肽 蛋白纯化 细胞黏附
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: ·生物科学·基础医学
• 页码范围: 740-743
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.11713/j.issn.1009-4822.2020.06.008

摘要

目的 探讨含RGD肽的类弹性蛋白多肽RGD-ELPs和RDG-ELPs与细胞相容性及两种融合蛋白对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)黏附的影响.方法 应用大肠杆菌系统表达RGD-ELPs和RDG-ELPs蛋白,利用可逆相变循环(ITC)纯化两种融合蛋白;通过MTT法及活/死细胞染色法检测两种融合蛋白与人胚肾细胞(HEK293T)的相容性;通过贴壁细胞计数方法检测不同浓度RGD-ELP对体外HUVECs细胞黏附表达的影响.结果 利用BL21(DE3)大肠杆菌表达系统制备高浓度的RGD-ELPs和RDG-ELPs,通过ITC纯化得到了高纯度融合蛋白;MTT法及活/死细胞染色法结果提示RGD-ELPs和RDG-ELPs蛋白具有良好的相容性;细胞黏附实验结果表明:RGD-ELPs浓度越大,HUVEC细胞黏附能力越强,而对照组RDG-ELPs则未显示出明显的细胞黏附效果.结论 成功表达并纯化了RGD-ELPs和RDG-ELPs融合蛋白;两种蛋白均具有良好的细胞相容性;RGD-ELPs蛋白具有明显的促进HUVECs细胞黏附作用.