数字PCR法定量低浓度水平短链DNA标准物质的研究

• 作者: 刘刚 梁文 闻艳丽
• 来源期刊: 中国测试
• 学科: 工学
• 关键词: DNA标准物质 TP53基因 低浓度水平 数字PCR法
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 化学与生物测试
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: TB99
• 字数: 3711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11857/j.issn.1674-5124.2019060045

摘要

该文研制一种低浓度水平的短链DNA标准物质,用于低浓度水平ctDNA检测过程的量值溯源,重点对低浓度水平的短链基因标准物质的定值方法进行研究.首先选取TP53基因的一段300 bp长度的序列作为标准物质的目标序列,以数字PCR方法为研究方法,优化引物探针设计,通过考察PCR扩增的效率可以达到98.6％,满足数字PCR方法扩增的要求;然后采用转基因玉米NK603质粒分子国家标准物质验证数字PCR方法定值的准确度和精密度;其次考察数字PCR方法定量低浓度短链DNA标准物质TP53的重复性和重现性分别为2.99％和5.23％;最后采用数字PCR方法8家单位联合定值确定标准物质TP53的终浓度为(613.85±9.12)copies/μL(k=2),实现了对低浓度水平短链DNA标准物质的定值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘刚	上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量研究所	21	41	3.0	5.0
2	梁文	上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量研究所	9	8	2.0	2.0
3	闻艳丽	上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量研究所	4	3	1.0	1.0