U50,488H抑制心肌细胞缺氧/复氧诱导Drp1线粒体转位的作用及机制

• 作者: 刘振华 刘银姬 牛津 贾敏 付锋 裴建明 樊荣
• 来源期刊: 心脏杂志
• 关键词: κ-阿片受体 心肌细胞 缺氧/复氧 线粒体动力学 线粒体动力学蛋白51
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 565-571
• 页数: 7页
• 分类号: R364.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.12125/j.chj.202010053

摘要

目的 研究κ-阿片受体(κ-OR)激动剂U50,488H对缺氧/复氧(H/R)原代心肌细胞Drp1线粒体转位的作用与机制.方法 将心肌细胞共分为6组,分别为常氧(Control)组、H/R组、H/R+U50,488H组、Control+Scramble RNAi组、H/R+Scramble RNAi组、H/R+Mid51 RNAi组.利用CCK-8试剂盒检测细胞活力;AnnexinV、PI试剂盒检测细胞凋亡;采用激光共聚焦显微镜观察线粒体的形态变化和Drp1与线粒体共定位情况,Western blotting检测细胞内线粒体外膜Drp1相关结合蛋白(Fis1、Mff、Mid49和Mid51)的表达水平.结果 与常氧组相比,H/R组细胞凋亡与死亡率明显增加(P＜0.01),线粒体分裂明显增加(P＜0.01),Drp1的线粒体转位明显增多,Mid51表达显著上调(P＜0.01),但Fis1、Mff与Mid49的表达无明显差异;而κ-OR激动剂U50,488H可降低H/R后细胞凋亡与死亡率(P＜0.01),抑制线粒体分裂(P＜0.01),减少Drp1与线粒体的结合同时下调Mid51的表达水平(P＜0.01),但Fis1、Mff与Mid49的表达无明显变化;进一步研究发现,敲低Mid51可降低H/R后细胞凋亡与死亡率(P＜0.01,P ＜0.05),抑制线粒体的分裂(P＜0.01),减少Drp1的线粒体的转位.结论 H/R可引起线粒体分裂与心肌细胞损伤,激活κ-OR可通过下调Mid51抑制Drp1的线粒体转位,进而抑制线粒体分裂,从而减轻H/R损伤.