单壁碳纳米管载嗜水气单胞菌外膜蛋白亚单位疫苗的研制及免疫效果评价

• 作者: 姜倩雯 张丽珊 徐慧铭 李小艳 林向民 武瑶 赵怡扬
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 外膜蛋白 碳纳米管 注射免疫 浸泡免疫
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 页码范围: 1424-1434
• 页数: 11页
• 分类号: S942.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20190411755

摘要

为了筛选细菌的疫苗候选蛋白,本实验根据课题组前期的研究,挑选了2个嗜水气单胞菌外膜蛋白(A0KLQ6和A0KH89),以A0KHR9(OmpAII)为对照,通过比较外膜蛋白与碳纳米管载外膜蛋白通过腹腔注射与浸泡免疫模式,比较和评价斑马鱼的免疫反应与免疫保护效果.结果 显示,腹腔注射组和浸泡组与普通蛋白组对比,碳纳米管载蛋白能够显著提高斑马鱼免疫相关基因表达量.腹腔注射组在5μg剂量下免疫A0KHR9、A0KLQ6和A0KH89蛋白分别获得61.60％、65.39％ 和84.96％ 相对免疫保护率(relative immune protection rate,RPS),在5μg剂量下免疫碳纳米管载蛋白SWCNTs-A0KHR9、SWCNTs-A0KLQ6和SWCNTs-A0KH89分别获得68.10％、77.50％ 和90.43％ 的RPSs.浸泡组在40mg/L剂量下免疫A0KHR9、A0KLQ6和A0KH89蛋白分别获得30.80％、25.85％ 和37.80％ 的RPSs,在40 mg/L最高剂量下免疫碳纳米管载蛋白疫苗SWCNTs-A0KHR9、SWCNTs-A0KLQ6和SWCNTs-A0KH89分别获得63.60％、73.74％ 和68.49％ 的RPSs.研究表明,铁离子限制下嗜水气单胞菌外膜蛋白A0KLQ6和A0KH89等能够作为抗嗜水气单胞菌的亚单位疫苗候选蛋白,而单壁碳纳米管载蛋白通过注射免疫与浸泡免疫均能显著提升免疫疗效,是一种疫苗的适宜纳米载体.以上研究为寻找高效的嗜水气单胞菌亚单位疫苗候选蛋白及佐剂提供了理论依据.