"自上而下"高分辨串联质谱法分析德谷胰岛素的序列

• 作者: 王建伟 田圃 赵莉
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 超高效液相色谱-高分辨串联质谱 高能碰撞诱导裂解 德谷胰岛素 "自上而下"序列分析 序列覆盖率
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1104-1110,前插15-前插19
• 页数: 8页
• 字数: 4848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.201138

摘要

基于"自上而下"的序列分析策略,采用高分辨串联质谱法对德谷胰岛素的氨基酸序列及B链C末端侧链非蛋白修饰序列进行了全面的分析.优化了德谷胰岛素的还原条件及串联质谱的碰撞条件,结果表明,联合使用50 mmol/L三(2-羧乙基)膦及6 mol/L盐酸胍,在45℃下反应40 min即可充分还原德谷胰岛素为两条独立的肽链;还原产物经Accucore C18色谱柱分离,采用静电场轨道阱高分辨串联质谱分析,当高能碰撞诱导裂解能量分别为20(A链)与25(B链)时,可获得最丰富的质谱碎片信息,可满足生物技术药物质量评价中100％的序列覆盖率的基本要求,亦可对问题样品提供更全面的序列解析.此方法未使用传统序列分析中昂贵且费时的测序级蛋白内切酶,降低了引入人为修改的风险,以更准确地获得序列信息,节约了成本,并显著提高了工作效率,为胰岛素类似物的序列分析提供了新的解决方案.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王建伟	吉林大学生命科学学院	14	185	6.0	13.0
5	赵莉	吉林大学生命科学学院	25	75	5.0	7.0
6	田圃	吉林大学生命科学学院	4	5	1.0	2.0