鸡马立克病疫苗株CVI988/Rispens meq基因编辑及缺失毒株的构建与鉴定

• 作者: 丁轲 余祖华 刘金玲 周子誉 杨森 楚钰淑 滕蔓 罗俊 郑鹿平
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马立克病 CVI988/Rispens meq基因 CRISPR/Cas9 基因编辑
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1970-1976
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 3655字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.08.021

摘要

meq是鸡马立克病病毒(MDV)最重要的致瘤基因,在马立克病(MD)肿瘤发生中发挥关键作用.同时,它在疫苗株和强毒株之间具有明显的序列差异性.本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以MDV疫苗株CVI988/Rispens meq基因为靶点,设计合成gRNA,克隆构建pX459-gRNA质粒,转染CEF并感染CVI988/Rispens,然后对meq基因编辑的病毒噬斑进行克隆纯化,经过PCR扩增、测序分析及IFA鉴定,成功构建1株meq基因编辑的缺失毒株CVI988Δmeq-C7,为后续筛选和鉴定抗MD疫苗株MEQ单抗及鉴别诊断研究奠定了基础.